logo

Penentuan kumpulan darah dan faktor Rh oleh siklon

29 Kaedah untuk penentuan kumpulan darah dan faktor Rh. Pencegahan ralat mungkin

Penentuan jenis darah menggunakan sera standard. Satu kejatuhan serum standard kumpulan 0 (1), A (P), B (W) dari dua siri yang berlainan bagi setiap kumpulan secara berturutan dipetik ke dalam telaga plat jenis darah. Kemudian setetes darah digunakan untuk setiap lupka, 5-10 kali kurang daripada serum. Kering kaca kering atau dengan menggoncang serum standard campuran plat dan darah ujian. Selepas 5 minit, menilai keputusan (jadual 2).

Penentuan jenis darah menggunakan sera standard

Kumpulan darah

Penentuan jenis darah oleh eritrosit standard. Di dalam telaga tablet menyebabkan penurunan besar plasma darah ujian. Di sebelah setiap titisan plasma, secara konsisten memakai setitik kecil erythrocyte standard kumpulan 0 (1), A (II), B (III). Titik bercampur dengan menggoncang tablet. Selepas 5 minit, 1 titis garam ditambah ke setiap titis campuran dan hasilnya diambil kira.

Penentuan jenis darah menggunakan sel darah merah standard

Kumpulan darah

Penentuan faktor Rh. Di bahagian bawah tiub ujian kering, 1 titisan besar reagen sejagat digunakan anti-rhesus, maka drop test darah yang sama ditambah. Selepas menggegarkan tiub, serum anti-Rhesus dan darah dicampur dengan kacau di sepanjang dinding tiub selama 5 minit, kemudian 5-7 ml garam ditambah. Kehadiran aglutinasi menunjukkan kehadiran faktor Rh.

Penentuan jenis darah dengan bantuan siklon. Anti-A, anti-B dan anti-AB poliklon direka untuk menentukan kumpulan darah manusia sistem ABO dalam tindak balas hemagglutination langsung dan digunakan sebagai ganti atau selari dengan sera kekebalan poliklonal.

Antibodi anti-A monoclonal dan anti-B dihasilkan oleh dua heliboma tikus dan tergolong dalam kelas imunoglobulin M. Siklon terbuat dari cecair asites dari pembawa tikus anti-A dan anti-B hibrid. Coliclon anti-AB adalah campuran antibodi anti-A dan antibodi monoklonal.

Siklon boleh didapati dalam bentuk cecair dalam botol 5 hingga 10 ml. Warna anti-A berwarna kuning, anti-B berwarna biru, anti-AB tidak berwarna. Natrium azide digunakan sebagai pengawet.

Teknik penentuan kumpulan darah. Penentuan dibuat dalam darah asli diambil sebagai pengawet; dalam darah yang diambil tanpa pengawet, termasuk dari jari. Kaedah hemagglutination langsung pada plat atau tablet digunakan, penentuan dilakukan di dalam bilik dengan pencahayaan yang baik pada suhu 15-25 X.

Sapukan pada plat atau plat dengan pipet individu anti-A, anti-B dan anti-AB poliklon dalam satu kejatuhan besar (0.1 ml) di bawah inskripsi yang sesuai.

Di sebelah titisan antibodi, satu drop kecil darah ujian digunakan (0.01-0.03 ml).

Campurkan darah dengan reagen dengan menggoncang pinggan.

Perhatikan kemajuan tindak balas dengan siklon visual dengan sedikit goyang tablet selama 3 minit. Agglutinin eritrosit dengan siklon biasanya berlaku dalam 3 hingga 5 saat pertama, tetapi pemerhatian harus disimpan selama 3 minit kerana penampilan aglutinin yang kemudian dengan eritrosit yang mengandungi jenis antigen A atau B.

Hasil tindak balas dalam setiap titisan boleh menjadi positif atau negatif. Hasil positif dinyatakan dalam agglutination (gluing) eritrosit. Aglutinat dapat dilihat dalam bentuk agretatas merah kecil, dengan cepat mencampur dengan serpihan besar. Dengan tindak balas negatif, titisan itu tetap merah sama rata, agglutinat tidak dikesan di dalamnya.

Tafsiran hasil tindak balas aglutinasi dengan siklon dibentangkan dalam Jadual. 4

Penentuan jenis darah dengan bantuan siklon

Penentuan kumpulan darah dan faktor Rh oleh siklon

29 Kaedah untuk penentuan kumpulan darah dan faktor Rh. Pencegahan ralat mungkin

Penentuan jenis darah menggunakan sera standard. Satu kejatuhan serum standard kumpulan 0 (1), A (P), B (W) dari dua siri yang berlainan bagi setiap kumpulan secara berturutan dipetik ke dalam telaga plat jenis darah. Kemudian setetes darah digunakan untuk setiap lupka, 5-10 kali kurang daripada serum. Kering kaca kering atau dengan menggoncang serum standard campuran plat dan darah ujian. Selepas 5 minit, menilai keputusan (jadual 2).

Penentuan jenis darah menggunakan sera standard

Kumpulan darah

Penentuan jenis darah oleh eritrosit standard. Di dalam telaga tablet menyebabkan penurunan besar plasma darah ujian. Di sebelah setiap titisan plasma, secara konsisten memakai setitik kecil erythrocyte standard kumpulan 0 (1), A (II), B (III). Titik bercampur dengan menggoncang tablet. Selepas 5 minit, 1 titis garam ditambah ke setiap titis campuran dan hasilnya diambil kira.

Penentuan jenis darah menggunakan sel darah merah standard

Kumpulan darah

Penentuan faktor Rh. Di bahagian bawah tiub ujian kering, 1 titisan besar reagen sejagat digunakan anti-rhesus, maka drop test darah yang sama ditambah. Selepas menggegarkan tiub, serum anti-Rhesus dan darah dicampur dengan kacau di sepanjang dinding tiub selama 5 minit, kemudian 5-7 ml garam ditambah. Kehadiran aglutinasi menunjukkan kehadiran faktor Rh.

Penentuan jenis darah dengan bantuan siklon. Anti-A, anti-B dan anti-AB poliklon direka untuk menentukan kumpulan darah manusia sistem ABO dalam tindak balas hemagglutination langsung dan digunakan sebagai ganti atau selari dengan sera kekebalan poliklonal.

Antibodi anti-A monoclonal dan anti-B dihasilkan oleh dua heliboma tikus dan tergolong dalam kelas imunoglobulin M. Siklon terbuat dari cecair asites dari pembawa tikus anti-A dan anti-B hibrid. Coliclon anti-AB adalah campuran antibodi anti-A dan antibodi monoklonal.

Siklon boleh didapati dalam bentuk cecair dalam botol 5 hingga 10 ml. Warna anti-A berwarna kuning, anti-B berwarna biru, anti-AB tidak berwarna. Natrium azide digunakan sebagai pengawet.

Teknik penentuan kumpulan darah. Penentuan dibuat dalam darah asli diambil sebagai pengawet; dalam darah yang diambil tanpa pengawet, termasuk dari jari. Kaedah hemagglutination langsung pada plat atau tablet digunakan, penentuan dilakukan di dalam bilik dengan pencahayaan yang baik pada suhu 15-25 X.

Sapukan pada plat atau plat dengan pipet individu anti-A, anti-B dan anti-AB poliklon dalam satu kejatuhan besar (0.1 ml) di bawah inskripsi yang sesuai.

Di sebelah titisan antibodi, satu drop kecil darah ujian digunakan (0.01-0.03 ml).

Campurkan darah dengan reagen dengan menggoncang pinggan.

Perhatikan kemajuan tindak balas dengan siklon visual dengan sedikit goyang tablet selama 3 minit. Agglutinin eritrosit dengan siklon biasanya berlaku dalam 3 hingga 5 saat pertama, tetapi pemerhatian harus disimpan selama 3 minit kerana penampilan aglutinin yang kemudian dengan eritrosit yang mengandungi jenis antigen A atau B.

Hasil tindak balas dalam setiap titisan boleh menjadi positif atau negatif. Hasil positif dinyatakan dalam agglutination (gluing) eritrosit. Aglutinat dapat dilihat dalam bentuk agretatas merah kecil, dengan cepat mencampur dengan serpihan besar. Dengan tindak balas negatif, titisan itu tetap merah sama rata, agglutinat tidak dikesan di dalamnya.

Tafsiran hasil tindak balas aglutinasi dengan siklon dibentangkan dalam Jadual. 4

Penentuan jenis darah dengan bantuan siklon

Kumpulan darah

Nota: tanda (+) menandakan kehadiran aglutinin, tanda (-) - ini adalah ketiadaan

Dengan hasil positif tindak balas aglutinasi dengan semua gegaran siklon, adalah perlu untuk mengecualikan aglutinasi nonspesifik spontan sel-sel darah merah yang dikaji. Untuk melakukan ini, campurkan pada satah 1 setetes erythrocytes yang dipelajari dengan setitik garam. Darah boleh dikaitkan dengan kumpulan AB (IV) hanya jika tiada aglutinasi eritrosit dalam salin fisiologi.

Penentuan faktor Rh dengan bantuan taufan. Sapukan 1 drop besar anti-D-super tsoliklon ke dalam lupka tablett seterusnya meletakkan 1 drop kecil darah ujian.

Goncangkan tablet, campurkan darah dengan siklon. Sepanjang reaksi, lihat dalam masa 3 minit. Kehadiran aglutinasi menunjukkan kehadiran faktor Rh.

Kaedah menentukan kumpulan darah menggunakan siklon

Terdapat siklon anti-A, anti-A, dan anti-AB. Mereka adalah antibodi monoklonal yang dihasilkan oleh dua heliboma tikus, tergolong dalam kelas imunoglobulin M dan direka untuk menentukan kumpulan darah seseorang mengikut sistem AB0. Siklon terbuat dari cecair ascitic tikus - pembawa anti-A dan anti-B hybridomas, sangat ketat dan, oleh itu, tidak boleh menyebabkan aglutinasi erythrosit yang tidak spesifik. Teknologi penyediaan reagen itu menghilangkan kemungkinan virus patogen kepada manusia.

Coliclon anti-AB adalah campuran antibodi anti-A dan antibodi monoklonal. Siklon dibebaskan dalam bentuk cecair dalam botol 5-10 ml. Siklon anti-A berwarna merah, anti-B berwarna biru, anti-AB tidak berwarna, ia masih tidak berwarna. Masa penyimpanan siklon pada suhu + 2-8 ° C adalah dua tahun; botol yang dibuka boleh disimpan pada suhu yang sama selama satu bulan dalam bentuk tertutup.

Keadaan untuk menentukan kumpulan darah oleh siklon adalah serupa dengan kaedah yang dinyatakan di atas. Di atas pinggan dengan pipet individu, di bawah inskripsi yang sesuai, masukkan satu drop besar (0.1 ml) anti-A, anti-B, dan anti-AB polyclones. Di sebelah titisan diletakkan satu titisan kecil dalam darah ujian (0.01-0.03 ml). Kemudian titisan bercampur dengan batang berasingan. Mereka memerhatikan perjalanan tindak balas dalam masa tiga minit, walaupun aglutinasi mungkin muncul selepas tiga hingga enam saat, tetapi tindak balas aglutinin lewat mungkin jika terdapat antigen lemah A atau B dalam eritrosit.

Hasil tindak balas dalam setiap titisan boleh menjadi positif atau negatif. Hasil positif dinyatakan dalam aglutinasi sel darah merah. Agglutinat dapat dilihat dengan mata kasar dalam bentuk benjolan merah kecil, dengan cepat bergabung dengan serpihan besar. Dengan tindak balas negatif, titisan itu tetap merah sama rata, agglutinat tidak dikesan di dalamnya.

Tafsiran hasil reaksi aglutinasi darah dengan siklon ditunjukkan dalam jadual 5.

Penilaian hasil penyelidikan:

1. Ketiadaan aglutinin dalam semua tetes menunjukkan bahawa tiada agglutinogens A dan B dalam erythrocyte yang dikaji, dan darah yang disiasat adalah milik 0 (I).

2. Kehadiran aglutinasi dalam titisan dengan anti-A dan anti-AB menunjukkan bahawa dalam erythrocyte yang dikaji terdapat antigen A dan darahnya adalah milik kumpulan A (II).

3. Kehadiran aglutinasi dalam titisan dengan anti-B dan anti-AB menunjukkan bahawa dalam erythrocyte yang dikaji terdapat antigen B dan darahnya adalah milik kumpulan B (III).

4. Kehadiran aglutinasi dalam semua titisan menunjukkan bahawa dalam erythrocyte yang dikaji terdapat kedua-dua antigen (A dan B) dan darahnya berada dalam kumpulan AB (IV). Dalam kes sedemikian, adalah perlu untuk mengetepikan aglutinasi spontan yang tidak spesifik terhadap erythrocyte yang dikaji. Untuk ini, sedikit penurunan darah ujian dicampur dengan larutan larutan natrium klorida isotonik (nisbah 1:10) dan, secara berasingan, reaksi diperiksa dengan serum kumpulan darah keempat. Dalam ketiadaan aglutinasi eritrosit dalam larutan fisiologi dan dalam serum kumpulan keempat, dapat dinyatakan bahawa darah pengujian adalah milik AB (IV). Kawalan berasingan dengan pelarut siklon tidak diperlukan, kerana ia tidak mengandungi sebarang aditif yang boleh menyebabkan aglutinasi eritrosit.

Zoliklon

Syclonic adalah penyelesaian garam antibodi monoklonal untuk antigen yang terletak di permukaan eritrosit manusia. Antibodi monoklonal untuk kolikon dihasilkan menggunakan kacukan, atau beberapa bakteria bakteria tertentu. Bakteria untuk industri tersebut diperolehi oleh kejuruteraan genetik.

Nama ubat itu berasal dari nama institut di mana mereka mencipta dan menghasilkan penyelesaian ini - Perintah Pusat Institut Lenin Transfusi Darah di Moscow, kini Pusat Penyelidikan Hematologi Agensi Persekutuan untuk Pembangunan Kesihatan dan Sosial.

Ciri-ciri dan ciri-ciri asas Anti-A, Anti-B dan Anti-AB Zoliklon

Antibodi Anti-A monoclonal dan anti-B dihasilkan oleh dua heliboma tikus dan termasuk imunoglobulin M kelas. - Dalam antibodi. Reagen teknologi pembuatan menghilangkan kemungkinan pencemaran virus patogenik manusia.

Teknik untuk menentukan kumpulan darah manusia sistem AVO menggunakan siklon

Penentuan dibuat dalam darah asli diambil sebagai pengawet; dalam darah yang diambil tanpa pengawet; dalam darah diambil dari jari. Kaedah hemagglutination langsung pada pesawat digunakan: pada plat atau tablet. Jenis darah ditentukan di dalam bilik dengan pencahayaan yang baik pada suhu 15-25 ° C. 1. Sapukan anti-A, Anti-B dan Anti-AB Zolikloni ke tablet atau pinggan dengan pipet individu dalam satu kejatuhan besar (0.1 ml) di bawah inskripsi yang sesuai. 2. Di sebelah titisan antibodi, gunakan satu drop kecil darah ujian (0.01-0.03 ml). 3. Campurkan darah dengan reagen, 4. Amati kemajuan reaksi dengan siklon visual dengan sedikit goyang plat atau plat selama 3 minit. Agglutination eritrosit dengan siklon biasanya berlaku dalam 3-5 saat pertama, tetapi pemerhatian perlu dijalankan selama 3 minit kerana penampilan aglutinasi kemudian dengan eritrosit yang mengandungi jenis antigen yang lemah antaranya A atau B. 5. Hasil reaksi dalam setiap titisan boleh menjadi positif atau negatif. Hasil positif dinyatakan dalam agglutination (gluing) eritrosit. Agglutinat dapat dilihat dengan mata kasar dalam bentuk agregat merah kecil yang cepat bergabung menjadi serpihan besar. Dengan tindak balas negatif, titisan itu tetap merah sama rata, agglutinat tidak dikesan di dalamnya. 6. Tafsiran hasil tindak balas aglutinasi darah ujian dengan siklon ditunjukkan dalam jadual:

Dalam amalan, polyclones digunakan untuk menentukan kumpulan darah. Pada masa ini, terdapat sejumlah besar siklon untuk antigen yang berbeza, yang direka untuk menentukan kumpulan darah untuk pelbagai sistem. Yang paling biasa digunakan adalah siklon anti-A (cecair merah), anti-B (cecair biru) dan anti-D (cecair telus). Dua tsoliklon pertama bertujuan untuk menentukan kumpulan darah pada sistem AB0, yang terakhir - untuk menentukan kumpulan darah pada sistem Rh. Di samping itu, ia adalah perkara biasa untuk menggunakan coliclon anti-A1 (lectin), membenarkan pembawa A-antigen untuk memilih populasi pembawa A2-antigen yang lemah (iaitu individu dengan kumpulan darah A2 (II) atau A2B (IV). Tidak menggunakan siklon anti-A1 yang penuh dengan hasil yang salah bagi kategori orang ini. (O (0) dan bukannya A2 (II) dan B (III) dan bukan kumpulan darah A2B (IV) mungkin). Coliclon anti-D mempunyai 2 pengubahsuaian: anti-D sendiri, digunakan dalam amalan diagnostik perubatan dalam kombinasi dengan 10% gelatin, dan anti-D-super, yang membolehkan penentuan pesat faktor Rh (semua yang Rh-negatif Sampel memerlukan ujian mandatori dengan anti-D oleh siklon, kerana pembawa antigen lemah sistem Rhesus mungkin.).

Borang pelepasan

Siklon dihasilkan dalam bentuk cecair dalam botol plastik 10 ml dengan penitis atau dalam botol kaca 5 ml. Anti-Kolikol berwarna merah, Anti-B biru dan Anti-AB tidak berwarna. Natrium azida pada kepekatan akhir sebanyak 0.1% digunakan sebagai pengawet.

Penyimpanan

Hayat rak - 2 tahun pada suhu 2-8 ° C. Botol yang dibuka boleh disimpan pada suhu 2-8 ° C selama sebulan dalam bentuk tertutup.

Kesusasteraan

  • Arahan penggunaan cecair diagnostik Anti-A, Anti-B dan Anti-AV COLICLONS bagi penentuan kumpulan darah manusia sistem ABO (Diluluskan oleh Perintah No. 2 Kementerian Kesihatan Persekutuan Rusia pada 05.10.2000)

2. Penentuan jenis darah

Maklumat am. Kejayaan terapi transfusi berkait rapat dengan kejayaan isoserologi - sains antigen, antibodi dan kumpulan darah. K. Landsteiner, mengkaji sifat-sifat serologi darah, mendapati bahawa eritrosit manusia mengandungi antigen manusia. Pada masa yang sama dengan penemuan ini, dia mendapati keterlarutan mutlak kandungan antibodi semulajadi dalam plasma darah: terhadap antigen eritrosit pada seseorang yang diberikan tidak pernah ada antibodi plasma yang sama dalam plasma.

Atas dasar data ini, Landsteiner pada tahun 1901 memperkenalkan konsep pengelompokkan darah dan membahagi semua orang menjadi tiga kumpulan berdasarkan ciri serologi sel darah merah. Pada tahun 1907, J. Jansky membuktikan bahawa manusia secara semulajadi mempunyai empat jenis darah.

Pada tahun 1910, ia dicadangkan untuk menamakan antigen erythrocyte manusia sebagai agglutinogens A dan B, dan antibodi yang sesuai anti A dan anti B sebagai agglutinin α dan β.

Pada tahun 1928, klasifikasi kumpulan darah mengikut Jansky telah diterima pakai: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).

Takrif kumpulan darah berdasarkan reaksi isohemagglutinasi, iaitu tindak balas interaksi antibodi plasma dengan antigen erythrocyte yang bersamaan, sebagai akibatnya pengintip erythrocyte dalam bentuk bijirin atau bijirin pasir diperhatikan.

Agglutinogens dan agglutinin darah.

Agglutinogens darah, polysaccharides dalam struktur, dilokalkan dalam sel darah. Pada masa ini, lebih daripada 100 agglutinogens yang berbeza telah dijumpai dalam darah manusia, yang dikelompokkan ke dalam sistem antigen: ABO, Rh-hr, MN, P, Duffy, Lewis, dan lain-lain.

Menilai kepentingan klinikal dari pelbagai agglutinogens, satu harus menjadi yang utama: antigen dari sistem ABO dan faktor Rh, yang paling sering menyebabkan komplikasi pasca-transfusi. Oleh itu, faktor-faktor ini sentiasa diambil kira semasa transfusi darah. Kejadian komplikasi dengan kesesuaian faktor-faktor ini menunjukkan ketidakcocokan darah penderma dan penerima dalam sistem lain. Dalam kes sedemikian, pemilihan individu darah penderma diperlukan, yang sepatutnya dilakukan di jabatan atau di stesen transfusi darah.

Agglutinogen "0" adalah antigen lemah dan dikesan hanya oleh sera khas. Walaupun dengan pengembalian semula ke dalam badan, antibodi untuknya tidak dapat dibentuk.

Agglutinin adalah plasma gamma globulins (immunoglobulins). Agglutinin dibahagikan kepada alam semula jadi - secara genetik ditentukan, seumur hidup, seperti antibodi anti A dan anti B, dan imun, yang muncul pada manusia akibat imunisasi dengan agglutinogens asing, seperti antibodi anti-Rhesus.

Oleh itu, di bawah kumpulan darah bermakna beberapa kombinasi antigen yang berbeza (agglutinogens) daripada eritrosit dan antibodi (agglutinin) plasma darah.

Dalam tab. 3. Agglutinogens dan agglutinin utama sistem AB0 dibentangkan, mencirikan ciri-ciri serologi setiap empat kumpulan darah.

Jadual 3. Agglutinogens dan agglutinin ciri setiap kumpulan darah

Kumpulan darah oleh sistem AB0

Menurut M.A. Umnova (1964), jenis darah A (II) lebih kerap berlaku pada populasi - 37.8%, kemudian 0 (I) - 33.5%, kurang B (III) dan AB (IV) - 8, 2%. Ciri-ciri kumpulan darah manusia adalah ciri kekal; mereka berlaku dalam tempoh pranatal pembangunan, berterusan sepanjang hayat dan diwarisi.

Jika semasa pemindahan darah manusia, agglutinogens dengan nama dan agglutinin yang sama (A dan α, B dan β) bertemu, maka aglutinasi berlaku, diikuti dengan hemolisis sel darah merah, yang merupakan komplikasi yang serius, yang sering berakhir dengan hasil yang fatal (maut).

Sistem Rhesus. Peningkatan transfusi darah dalam tempoh ketika kewujudan kumpulan darah dalam sistem AB0 sudah diketahui, namun sistem Rezus belum ditemui, disertai dengan peningkatan jumlah komplikasi pasca transfusi yang terjadi walaupun transfusi darah serasi dengan AB0. Alasan untuk tindak balas ini ditentukan oleh Landsteiner dan Wiener (1937-1939). Mereka mendapati bahawa pengenalan erythrocyte monyet jenis "Rhesus" kepada arnab disertai dengan perkembangan antibodi di kedua, yang agglutinate dalam 100% kes eritrosit monyet rhesus.

Memandangkan ini, antibodi ini dinamakan sebagai antibodi antiria. Kemudian didapati serum arnab ini, yang mengandung antibodi antiria, agglutinates sel darah merah sebanyak 85% orang bangsa kulit putih. Sel darah merah sebanyak 15% daripada orang-orang dalam perlumbaan ini tidak digabungkan dengan serum tersebut. Dari ini disimpulkan bahawa dalam 85% manusia, sel darah merah mengandungi antigen Rhesus (faktor Rhesus), ciri monyet Rhesus. Pada masa ini, faktor Rh yang biasanya dilambangkan oleh simbol: Rh (D) atau hanya D. Kemudian, kita perhatikan bahawa wanita dengan kumpulan 0 (I) yang melahirkan janin yang mati, apabila mereka mengalirkan darah suami mereka 0 (I), sebagai peraturan, memberikan tindak balas selepas pemindahan transfusi tipikal jenis hemolitik. Kajian menunjukkan bahawa wanita-wanita ini adalah Rh-negatif dan mengandung antibodi anti-Rhesus dalam darah, yang menyebabkan hemolisis darah suami mereka, yang serasi dengan mereka dalam kumpulan darah. Disimpulkan bahawa wanita Rh-negatif boleh diimunisasi oleh eritrosit janin Rh-positif, yang mewarisi darah jenis ini dari bapa Rh positif. Pada masa yang sama, didapati bahawa orang Rh-negatif (lelaki dan wanita) boleh diimunisasi dengan darah Rh-positif, dan kaedah memperkenalkannya ke dalam badan tidaklah penting.

Antibodi terhadap antigen daripada sistem Rhesus, terutamanya anti-Rhesus antibodi (anti-D antibodi), timbul hanya akibat imunisasi apabila transfusing darah Rh yang tidak serasi (transfusi darah) atau semasa mengandung dengan wanita Rh-negatif dengan janin Rh-positif. Dalam kes ini, antigen atau eritrosit janin menembusi melalui halangan plasenta ke dalam aliran darah ibu dan menyebabkan kepekaan badannya, manifestasi yang merupakan antibodi anti-Rhesus. Apabila terkumpul dalam kepekatan tertentu, antibodi anti-Diz aliran darah ibu memasuki badan janin, ditetapkan pada sel-sel darah merah dan memusnahkan (hemolyze) mereka. Hasilnya adalah apa yang dipanggil "konflik Rhesus" - satu kes konflik biologi khas antara ibu dan janin, kerana Rh-incompatibility. Harus diingat bahawa konflik biologi akibat ketidakcocokan darah ibu dan janin dalam kumpulan darah AB0 (AB0-konflik) kurang biasa dan terus menjadi lebih baik. Selalunya, ia berlaku dalam kombinasi: ibu - kumpulan 0 (I) - janin - kumpulan A (II). Pada masa yang sama, kumpulan agglutinin (anti-A antibodi) memusnahkan eritrosit janin kumpulan A (II).

Anti-Rhesus antibodi berterusan, sebagai peraturan, untuk kehidupan. Titer antibodi ini mungkin berkurangan, tetapi apabila berulang kali dengan antigen (pemindahan darah Rh yang tidak serasi atau kehamilan Rh yang tidak serasi), pengeluaran mereka dalam organisma sensitif meningkat dengan ketara.

Di Rusia, penentuan dwi kumpulan darah digunakan - 0 (I), A (II), B (III) dan AB (IV).

Orang yang dipunyai oleh kumpulan darah tertentu tidak bergantung kepada umur, jantina, bangsa. Jenis darah diwarisi mengikut undang-undang genetik. Ia adalah ciri biologi individu seseorang, yang telah ditentukan sejak awal perkembangan embrio dan tidak berubah sepanjang hayat berikutnya.

Kumpulan darah sistem AB0 adalah gabungan tertentu antigen erythrocyte kumpulan semula jadi yang terkandung dalam sel darah dan antibodi kepada mereka dalam plasma (serum).

Bahan dalam sel darah adalah antigen (agglutinogens) yang menyebabkan aglutinasi (gluing) sel-sel darah apabila mereka bertemu dan berinteraksi dengan antibodi plasma dengan nama yang sama, yang disebut agglutinin. Agglutinogen sel darah dilambangkan oleh huruf Latin A dan B, dan agglutinin oleh huruf Yunani α (anti-antibodi) dan β (anti-B antibodi). Ini dicerminkan dalam surat kumpulan darah.

Darah seseorang boleh secara serentak hanya mengandungi agglutinogens dan agglutinin yang bertentangan satu sama lain atau tidak mempunyai mana-mana. Jika tidak, agglutination (gluing) sel darah harus berlaku.

Bergantung pada kombinasi agglutinogens dan agglutinin, empat kumpulan darah dibezakan mengikut sistem AB0 - sistem antigenik utama dan paling penting sel darah manusia.

Dalam darah kumpulan pertama terdapat agglutinogen "sifar" (0), agglutinogens A dan B tidak hadir. Oleh itu, dalam plasma (serum) kedua-dua agglutinin - α dan β. Formula lengkap darah kumpulan I ialah 0αβ (I).

Dalam darah kumpulan II terdapat agglutinogen A dan agglutinin β. Formula lengkap kumpulan darah kedua ialah Aβ (II).

Dalam darah III, agglutinogen B dan agglutinin α hadir. Rumus lengkap kumpulan darah III ialah Вα (III).

Dalam darah kumpulan IV terdapat kedua-dua agglutinogen - A dan B dan tidak ada agglutinin. Lengkap formula kumpulan darah IV - AB0(Iv)

Dalam 88% orang dengan kumpulan darah A (II), satu jenis agglutinogen A ditentukan - A1, dan 12% mempunyai agglutinogen A2. Mereka berbeza antara satu sama lain dalam kekuatan keupayaan agglutinogennogo. Ketara lebih ketara dalam jenis A1. Sehubungan itu, kumpulan darah AB (IV) juga mempunyai dua subkumpulan: A1B (IV) dan A2B (IV). Pembahagian menjadi subkumpulan adalah kepentingan praktikal yang besar dalam menentukan kumpulan darah. Tanpa mengetahui ini, anda boleh tersilap menentukan kumpulan darah 0 (I) - bukannya A (II), dan B (III) - bukan AB (IV). Ini disebabkan oleh fakta bahawa dengan adanya agglutinogen yang lemah A2aglutinasi dalam menentukan kumpulan darah datang lewat (kadang-kadang pada 4 - 5 minit) dan sangat lemah.

Gabungan kumpulan darah sistem AB0 ditentukan oleh reaksi aglutinasi menggunakan sera isohemagglutinating standard atau polyclones (antibodi monoklonal).

Reaksi imun digunakan untuk menentukan kumpulan darah - tindak balas hemagglutinasi. Reaksi hemagglutinasi ialah perekat dan pemendakan, dalam bentuk ketulan, eritrosit (membawa antigen) di bawah tindakan antibodi serum dengan nama yang sama. Aglutinasi kumpulan adalah aglutinasi sel khusus yang berlaku di bawah tindakan antibodi yang diarahkan kepada antigen kumpulan sel ini. Antigen yang terlibat dalam tindak balas aglutinasi disebut agglutinogen. Antibodi yang ditujukan terhadap erythrocyte dengan nama yang sama dan memiliki sifat agglutinating mereka dipanggil hemagglutinin (hemagglutinating antibodi).

Penentuan sistem kumpulan darah AB0 dalam tiga cara.

= Menggunakan sera isohemagglutinating standard.

= Dengan bantuan siklon.

= Dalam cara salib, iaitu serentak menggunakan sogol isohemagglutinin standard (atau polyclones) dan sel darah merah standard. Dalam kaedah ini, seperti pada dua pertama, kehadiran atau ketiadaan antigen erythrocyte ditentukan dan, di samping itu, doktor makmal (dalam makmal) menentukan kehadiran atau ketiadaan antibodi kumpulan dalam serum darah ujian menggunakan erythrosit standard

Untuk kajian imuno-serologi (penentuan kumpulan sistem darah AB0, aksesori Rhesus, ujian keserasian individu darah penderma dan serum penerima), darah penerima (erythrocytes dan serum) digunakan untuk tempoh tidak lebih daripada dua hari pada + 20... + 60 kekurangan hemolisis dalam vitro).

A. Pengumpulan darah dengan sera isohemagglutinating standard.

Sera standard untuk penentuan kumpulan darah dibuat oleh institusi pelayanan darah (jabatan, stesen dan institut transfusi darah). Mereka disediakan dari serum manusia dan mengandungi pelbagai kombinasi dan dalam kuantiti yang mencukupi kumpulan isoagglutinin α dan β, yang bertindak balas dengan antibodi antibodi dengan antigen AB0 sistem sel darah merah dikaji, merekatkan mereka (agglutinating).

Di negara kita, apabila menentukan kumpulan darah, perlu menggunakan serum standard empat kumpulan: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV). Yang terakhir ini tidak mengandungi kumpulan isoagglutinin dan tidak boleh memberikan reaksi aglutinasi (isoserologically neutral). Sera berwarna dan mempunyai warna berikut menandakan dalam urutan yang disenaraikan: berwarna, biru, merah, kuning. Apabila memohon serum standard ke pesawat di mana jenis darah ditentukan, adalah perlu untuk memerhatikan urutan warna yang sama (kawalan ketepatan aplikasi ke satah serum standard). Sera standard dikeluarkan oleh pengeluar dalam botol tertutup (seperti untuk insulin) atau ampul. Label pada kapal ini dengan serum standard dilabelkan: nama institusi yang mengeluarkan serum; keahlian kumpulan serum ini dengan kod di atas - 0 (I), A (II), dan sebagainya; titisan antibodi, jumlah (biasanya 2-5 ml) serum, tarikh tamat tempoh; satu siri yang menunjukkan nombor siri pengeluaran dalam tahun semasa. Di samping itu, label ditandakan dengan jalur warna, bilangan dan warna yang sesuai dengan penentuan kumpulan serum.

Sebagai contoh, serum 0 (I) tidak berwarna dan oleh itu tiada band, serum A (II) mempunyai dua band biru, serum B (III) mempunyai tiga warna merah dan AB (IV) mempunyai empat jalur kuning. Titer serum adalah pencairan maksimumnya, di mana reaksi aglutinasi dapat dilihat oleh mata kasar; nilainya dijamin oleh pengeluar serum.

Jenis darah ditentukan dalam bilik yang terang pada suhu +15. +25 "S.

Mana-mana plat putih (plat, plastik) dengan permukaan yang basah (di mana serum jatuh tidak merebak) atau tablet khas digunakan. Nama akhir dan inisial orang yang jenis darahnya ditentukan ditulis di tepi atas. Plat khas mempunyai sebutan di atas telaga, mengikut mana serum standard digunakan. Pada plat yang disesuaikan untuk menentukan kumpulan darah di bahagian atas, dari kiri ke kanan, inskripsi diletakkan: O (I), A (II), B (III) dan, jika perlu, AB (IV). Serangkaian serum standard yang berbeza digunakan dalam dua baris di bawah sebutan yang sama. Dalam baris atas dan bawah, sera kumpulan tunggal harus siri yang berbeza (tidak sepadan). Iaitu, dua siri sera bagi setiap kumpulan digunakan. Setiap serum digunakan dengan pipet yang berasingan (paling kerap menggunakan pipet mata), jadi pipet harus diberi label (0, A, B, AB) dan hanya dalam botol mereka (ampul). Bagi setiap botol serum, pipet berlabel berasingan dilepaskan, yang, selepas memakai serum pada plat, segera diturunkan ke dalam botol dengan serum yang diambilnya. Di dalam pesawat, di sebelah titisan serum standard, titisan darah ujian digunakan dengan tongkat (atau sudut slaid mikroskop); nisbah "serum - darah" harus 10: 1. Kira-kira penurunan serum piawai sepadan dengan nilai syiling sen, setem darah - saiz kepala pin penjahit (darah untuk penyelidikan boleh diambil dari jari, urat, penggantungan sel darah merah (dari bahagian bawah tiub), dari tiub tertutup kontena dengan medium hemotransfusi.

Titisan darah perlu kira-kira 10 kali lebih rendah daripada setip serum piawai (nisbah 1:10), yang mana ia bercampur dengan batang kaca kering (sudut kaca). Selepas mengaduk titisan dalam warna merah seragam, plat digeret, dibiarkan selama 1-2 minit sahaja, dan kemudian secara berkala bergoyang lagi. Tidak lebih awal daripada 3 minit, jatuh, di mana aglutination berlaku ("butiran pasir", "butiran" boleh dilihat dengan mata kasar), tambah 1 drop (0.05 ml) larutan NaCl fisiologi. Setelah membuat larutan garam, aglutinasi palsu akan hilang, yang sebenarnya tidak berubah atau meningkat. Walaupun aglutinasi bermula dalam 10 hingga 30 saat pertama, pemerhatian harus diteruskan sehingga 5 minit telah berlalu, dan kemudiannya dibuat tentang jenis darah.

Reaksi hemogglutination boleh positif (kehadiran aglutinasi) atau negatif (ketiadaan aglutinasi). Keputusan dalam titisan dengan sera dua siri yang berbeza dari kumpulan darah yang sama harus sama. Keputusan definisi dapat memberikan empat kombinasi reaksi positif dan negatif yang berbeda:

1) jika sera dari ketiga-tiga kumpulan memberikan tindak balas negatif, maka darah ujian tergolong dalam kumpulan 0 (I);

2) jika sera kumpulan 0αβ (I) dan Bα (III) memberikan reaksi positif, dan serum kumpulan Aβ (II) adalah negatif, maka darah yang disiasat adalah kumpulan A (II);

3) jika sera kumpulan 0αβ (I) dan Aβ (II) memberikan tindak balas yang positif, dan serum kumpulan Bα (III) adalah negatif, maka darah ujian itu adalah kumpulan B (III);

4) jika sera dari ketiga-tiga kumpulan memberikan tindak balas yang positif, untuk tidak memasukkan aglutinasi yang tidak spesifik, perlu melakukan kajian tambahan dengan serum (satu siri) AB0 (IV). Sekiranya tindak balas dengan serum ini negatif, maka darah ujian benar-benar tergolong dalam kumpulan AB (IV).

Penilaian hasil pengelompokkan darah menggunakan sera isohemagglutinating standard diberikan dalam jadual:

Penilaian keputusan penentuan kumpulan darah menggunakan sera isohemagglutinating

Algoritma untuk menentukan kumpulan darah (Rh) oleh siklon dan cara melakukannya menggunakan jadual

Penentuan jenis darah oleh siklon dilakukan kepada wanita hamil sebelum melahirkan anak, kepada orang sakit sebelum pembedahan, dan apabila pemindahan darah diperlukan. Ada kaedah lain yang menggunakan bahan-bahan yang berlainan, tetapi kaedah ini adalah yang paling tepat dan digunakan paling kerap.

Apa cyclone itu

Untuk penentuan kumpulan darah, siklon adalah antibodi yang dihasilkan oleh teknologi khas. Untuk mendapatkan siklon, gunakan tikus ujian makmal. Rodents disuntik dengan ejen khas, dan kemudian darah diambil dari peritoneum, ia termasuk bahan-bahan yang diperlukan untuk analisis.

Dalam komposisi mereka, polyclones tergolong dalam imunoglobulin; mereka bertindak balas dengan antigen pada membran erythrocyte. Jenis bahan ini digunakan untuk mengenal pasti kumpulan. Semasa analisis, pelbagai jenis siklon bertindak balas dengan agglutinogen, ini memungkinkan untuk mengenal pasti kumpulan dan faktor Rh kepada seseorang.

Ubat ini dihasilkan dalam bentuk cecair dalam botol 5 dan 10 ml. Setiap jenis ubat mempunyai ciri-ciri sendiri.

Siklon dibezakan oleh kelebihan ke atas serum lain, sejak tidak memerlukan persediaan yang panjang untuk tinjauan dan membuatnya mudah untuk membuatnya cepat. Mereka bukanlah sel-sel manusia, oleh itu doktor tidak akan dapat menangkap sebarang jangkitan apabila mereka bersentuhan dengan mereka.

Persediaan untuk prosedur

Pejabat harus bebas dari debu, lalat, serangga, yang dapat mengganggu ujian. Bilik itu perlu diterangi dengan baik. Botol dengan tanah jajahan mesti tertutup rapat supaya reagen tidak kering, jika tidak, kebolehpercayaan analisis akan berkurangan. Untuk menentukan kumpulan darah dan rhesus dengan bantuan siklon, latihan khusus diperlukan. Di dalam bilik makmal, suhu udara boleh + 15... + 25ºC, yang mana hasilnya akan tepat.

Sebelum analisis, sediakan instrumen perubatan yang perlu:

  • tiub ujian;
  • sebuah tablet di mana reagen digunakan;
  • pipet;
  • kayu untuk penyingkiran sampel makmal.

Sekiranya profesional perubatan tidak hanya melakukan penyelidikan, tetapi juga mengambil analisis dari pesakit, maka anda perlu menyediakan:

  • memanfaatkan;
  • alkohol untuk rawatan perubatan;
  • jarum suntikan sekali pakai;
  • tiub ujian;
  • kapas kapas;
  • tuala;
  • penanda makmal khas.

Bagaimanakah kajian dilakukan?

Algoritma untuk menentukan kumpulan darah oleh siklon adalah seperti berikut. Ujian makmal dijalankan menggunakan 3 jenis bahan:

  • "Anti-A" adalah merah, botol, tudung dan label penyediaan mempunyai naungan yang sama.
  • "Anti-B" mempunyai warna biru, serta penutup, botol dan label, dicat dengan nada biru.
  • "Anti-D" tidak berwarna dan terdapat dalam botol yang telus.

Apabila menentukan faktor Rh oleh siklon, reagen-substansi yang tidak boleh digunakan. Sekiranya vial itu rosak atau terdapat sedimen di dalam cecair, reagen itu akan hilang kesannya. Untuk menentukan kumpulan, pekerja perubatan menggunakan siklon di atas plat makmal, dibuat dalam bentuk meja. Reagen jenis yang berbeza digunakan (A, B dan D). Setiap sampel ditandatangani. Coliclon digunakan untuk kawasan yang ditandakan. Setiap jenis reagen diambil dengan pipetnya.

Di sebelah serum menenggelamkan 1 setem darah manusia, maka batang bersih itu diaduk dengan reagen. Selepas beberapa saat, tindak balas akan bermula. Pembantu makmal memantau reagen selama 3 minit. Kemudian anda boleh mentafsirkan hasil analisa.

Keputusan penyahkodan

Penentuan jenis darah dengan bantuan siklon berlaku apabila memecahkan keputusan analisis. Sekiranya tiada tindak balas gluing dalam sampel, ia bermakna bahawa tiada agglutinogen jenis ini dalam analisis. Dalam kes ini, analisis merujuk kepada kumpulan 1. Jika sel-sel bertindak balas dengan reagen "Anti-A" dan "Anti-D", maka orang itu mempunyai jenis 2 (A).

Interaksi eritrosit dengan jenis tsiklonona "Anti-B" dan "Anti-D" menunjukkan bahawa orang itu mempunyai 3 kumpulan (jenis B). Sekiranya betis berinteraksi dengan semua jenis siklon, maka pesakit mempunyai 4 jenis darah (jenis D). Apabila kumpulan darah dikesan dengan bantuan reagen ini, tidak perlu melakukan pemeriksaan tambahan, kerana Siklon tidak mempunyai apa-apa bahan tambahan yang menyebabkan tindak balas yang salah. Jenis darah ditentukan di institusi perubatan, analisis dilakukan di makmal khusus.

Jadual tafsiran hasil kajian:

Ujian ini membolehkan anda mengetahui data penting mengenai kumpulan dan faktor Rh pesakit. Hasilnya membolehkan anda menyediakan rawatan perubatan dan pemindahan darah kepada pesakit selepas pembedahan. Untuk mengetahui kumpulan anda, anda boleh menjalankan analisis di makmal di mana-mana institusi perubatan. Maklumat dimasukkan ke dalam soal selidik pesakit dan data yang diperoleh disimpan dalam klinik selama beberapa tahun.

Penentuan kumpulan darah dan faktor Rh oleh siklon

Apa siklon

Untuk rujukan. Agglutination - ikatan dan pemendakan.

Prinsip tindakan terdiri daripada menggabungkan dengan agglutinogens - komponen kimia yang terletak di lapisan atas sel darah merah tertentu. Bergantung kepada tindak balas, ia menjadi mungkin untuk menentukan kumpulan darah oleh siklon. Kehadiran agglutinogen A ditunjukkan oleh reagen anti-A, masing-masing, agglutinogen B dikesan dengan bantuan bahan anti-B.

Perhatikan bahawa siklon adalah alat serba boleh. Mereka membenarkan menentukan kumpulan darah dalam sistem AB0 (menggunakan reagen anti-A (cecair merah) dan anti-B (cecair biru) dan dalam sistem rhesus (menggunakan reagen anti-D (cecair telus).

Untuk rujukan. Untuk kajian ini digunakan darah asli (hidup) dalam pengawet atau tanpanya, diambil dari jari.

Penentuan kumpulan darah oleh siklon

Untuk mengetahui GK menggunakan zoliklon, anda mesti mengambil produk dengan permukaan yang rata (tablet), reagen itu sendiri dan dua titik darah. Praktik mana-mana cecair sesuai untuk analisis, tanpa mengira keadaan (dipelihara atau tanpa pengawet) dan kaedah pensampelan (dari vena / jari). Sebelum memohon pada permukaan tanda tablet dibuat, menunjukkan di mana satu atau koliklon lain akan digunakan.

Selepas persiapan permukaan, juruteknik makmal memohon setitik reagen yang besar kepadanya: biasanya anti-A diletakkan di sebelah kiri dan anti-B ditempatkan di sebelah kanan. Kemudian bahan tersebut ditambahkan ke drop darah, ukurannya sepuluh kali kurang dari jumlah cairan yang digunakan.

Tablet mesti perlahan-lahan digegarkan dari sisi ke tepi supaya siklon dan darah bercampur, tetapi titisan dengan reagen berbeza tidak bergabung dengan satu sama lain. Selepas beberapa minit, anda boleh melihat sambungan lengkap cecair atau reaksi aglutinasi, apabila eritrosit melekat bersama, dan pembekuan berlaku.

Hasil kajian tersebut ditafsirkan sebagai berikut:

  • Ketiadaan aglutinasi dalam kedua-dua kes menentukan kumpulan pertama.
  • Lipat apabila terkena tsikryklon anti-A menunjukkan bahawa darah adalah milik kumpulan kedua.
  • Aglutination dalam penurunan dengan reagen anti-B adalah tanda kumpulan ketiga.
  • Pemendakan dalam kedua-dua titik menunjukkan bahawa mereka tergolong dalam kumpulan keempat.

Dalam kes tindak balas yang lepas, data diperlukan untuk diperiksa menggunakan analisis berulang: penurunan darah bercampur dengan siklon anti-AB, penampilan aglutinasi akan mengesahkan hasil kajian pertama. Cek kedua tidak termasuk lekatan sel darah merah yang tidak spesifik, yang dapat terjadi dengan adanya sejumlah penyakit serius.

Dalam kajian kedua, darah ditambah kepada larutan natrium klorida: jika cecair tergolong ke dalam kumpulan keempat, tidak boleh menjadi tindak balas positif kepada saline, jika tidak, ia adalah persoalan kehadiran penyakit yang mengubah sifat-sifat sel darah.

Penentuan Rh

  • Kira-kira 0.1 ml reagen digunakan pada permukaan tablet.
  • Berhampiran penurunan 0.01 darah yang dikaji.
  • Siklon dan cecair di bawah kajian bercampur dengan rod kaca khas, tablet mesti digerakkan setiap setengah minit.

Ia penting! Kemunculan aglutinasi dicatatkan selepas 15 saat selepas pencampuran, kesan yang jelas kelihatan selepas 60 saat, tetapi hasilnya, yang boleh dianggap sah, diperhatikan hanya selepas 3 minit. Sepanjang masa tablet perlu digegarkan.

Apabila melekat dan menahan sel-sel darah merah, darah dianggap Rh-positif, dan jika tiada aglutinasi, Rh-faktor mendapat tanda negatif. Anda dapat melihat hasil penampilan serpihan erythrocyte tanpa menggunakan peralatan makmal khusus.

Teknik Pengesanan Kumpulan Menggunakan Koloni

Penentuan oleh kaedah ini dijalankan di bawah keadaan makmal. Suhu udara harus berada dalam +15 - + 25 darjah Celsius. Kajian ini perlu dijalankan dengan pencahayaan yang cukup baik.

Reagen mesti disimpan dengan ketat, kerana aktiviti antibodi berkurang dengan ketara apabila pengeringan. Jangan gunakan yang mengandungi reagen dan serpihan turbin. Setiap reagen memerlukan pipet berasingan.

Analisis dilakukan pada plat putih atau tablet dengan permukaan yang dibasahi dengan baik. Oleh kerana aktiviti yang tinggi dan keresahan siklon, terdapat kemungkinan menggunakan siri anti-A dan anti-B reagen.

Di tablet, anda perlu membuat inskripsi dengan nama-nama antigen anti-A / anti-B. Selanjutnya, kira-kira 0.1 mililiter siklon menetes dari inskripsi sepadan di bawah. Anti-A berwarna kuning kekuningan dan anti-B berwarna biru.

Penentuan jenis darah

Berhampiran antibodi monoklonal meneteskan satu setitik darah, bercampur dengan sudut slaid kaca atau batang kaca dengan reagen. Bilas dengan teliti dan keringkan kaca atau tongkat sebelum pencampuran selanjutnya.

Pemerhatian proses aglutinasi dilakukan selama 2.5 minit, manakala plat atau tablet harus sedikit digoncang. Selepas masa, menilai hasilnya. Perlu diperhatikan bahawa pemerhatian aglutinasi tidak memerlukan sebarang peranti khas.

Agglutinat jelas kelihatan walaupun pada mata kasar, dengan cepat menggabungkan dan membentuk kepingan besar. Sekiranya gluing tidak berlaku, setitik reagen memperoleh warna merah seragam.

Keputusan penyahkodan

Jadual perbandingan kumpulan darah dan zoliklon membolehkan anda memahami hasilnya.

Penentuan kumpulan darah oleh siklon

✓ Perkara yang disahkan oleh doktor

Takrif kumpulan darah dan faktor Rh memainkan peranan penting dalam kes-kes yang berkaitan dengan menyelamatkan nyawa seseorang. Atas sebab ini, kajian sedemikian dijalankan di semua pesakit dalam tempoh praoperasi, pada wanita hamil sebelum melahirkan anak, dan dalam banyak situasi lain yang mungkin memerlukan transfusi segera. Terdapat beberapa cara untuk menentukan jenis darah menggunakan reagen makmal yang berbeza, dan salah satunya berdasarkan penggunaan bahan kimia yang dipanggil polyclones. Apakah penentuan kumpulan darah oleh siklon dan bagaimana tatacara dilakukan?

Penentuan kumpulan darah oleh siklon

Apakah analisis untuk?

Faktor kumpulan dan Rh adalah ciri genetik yang ditentukan oleh darah yang diwarisi dari orang tua dan tidak berubah sepanjang hayat seseorang. Klasifikasi kumpulan darah dilakukan berdasarkan satu set parameter biokimia tertentu dan komposisi antigen, dan mempunyai 4 kumpulan utama. Transfusing darah kumpulan tidak serasi atau faktor Rh yang lain kepada pesakit membawa bahaya manusia - sistem imun mula menghasilkan antibodi terhadap sel asing yang menyerang dan memusnahkannya. Oleh sebab itu, dalam keadaan yang membawa risiko kehilangan darah yang besar, perlu menentukan secara tepat darah dan faktor Rh untuk penderma dan penerima.

Jadual kumpulan darah dan faktor Rh

Apa siklon?

Cyclones adalah antibodi yang diperoleh melalui teknologi kejuruteraan genetik. Biasanya, tikus makmal diambil untuk mendapatkan siklon - penyediaan khas disuntik ke dalam haiwan, selepas itu cecair diambil dari rongga perut - iaitu, ia mengandungi bahan-bahan yang diperlukan untuk analisis. Dari sudut pandang saintifik, cycloclones boleh dikaitkan dengan immunoglobulin M, yang mampu bertindak balas dengan agglutinogens - sel-sel khusus yang terdapat pada permukaan sel darah merah.

Ia adalah agglutinogens, atau sebaliknya jenisnya, yang berfungsi sebagai asas klasifikasi kumpulan darah: contohnya, kumpulan pertama pembawa tidak mempunyai bahan ini, yang kedua mempunyai agglutinogens jenis A, dan sebagainya. Selama prosedur, siklon tertentu bereaksi dengan berbagai jenis agglutinogenov, yang membolehkan kita menentukan kumpulan darah pesakit.

Jenis darah dan faktor Rh - foto

Siklon dihasilkan dalam bentuk cecair yang dicurahkan ke dalam botol 5 ml atau 10 ml, setiap jenisnya mempunyai ciri-ciri tertentu:

  • anti-A adalah cecair kemerah-merahan;
  • anti-B mempunyai warna biru;
  • anti-AB (anti-D) adalah penyelesaian telus yang tidak berwarna.

Kelebihan siklon di atas reagen kimia lain adalah bahawa mereka tidak memerlukan penyediaan khusus untuk analisis dan membolehkan anda untuk menjalankannya secepat mungkin. Di samping itu, mereka bukanlah sel-sel badan manusia, oleh itu, jangkitan oleh kakitangan perubatan apabila bersentuhan dengan zat-zat sepenuhnya dikeluarkan.

Penentuan kumpulan darah mengikut sistem AB0 menggunakan siklon anti-A dan Anti-B

Bagaimanakah penyelidikan dilakukan?

Satu permukaan rata (tablet) yang dibasahkan dengan air, satu set reagen kimia dan sampel cecair biologi diperlukan untuk menentukan kumpulan darah menggunakan siklon, dan seorang pakar boleh menggunakan mana-mana darah: kapiler, vena, beku, dan sebagainya.

    Bahagian-bahagian tablet dilabel agar tidak mengelirukan di mana salah satu atau satu lagi siklon akan digunakan.

Prosedur untuk menentukan kumpulan darah oleh kolikon

Tablet Jenis Darah

Ia penting! Selepas beberapa minit akan ada reaksi, mengikut mana yang mungkin untuk menentukan dengan ketepatan yang tinggi bahawa darah itu milik kumpulan tertentu.

Tafsiran hasil

Tafsiran hasil prosedur dijalankan secara visual - cecair sama ada menggabungkan sepenuhnya, atau melekatkan (aglutinasi) sel-sel darah berlaku, akibatnya runtuhan biomaterial dan bentuk serpihan kecil di dalamnya.

Decryption adalah seperti berikut:

  • jika tindak balas tidak hadir dalam semua sampel bahan biologi, ia boleh diberikan kepada kumpulan I (ini bermakna bahawa tiada agglutinogen dalam sel darah);
  • reaksi sel darah dengan siklon anti-A menunjukkan bahawa darah orang uji itu tergolong dalam kumpulan II;
  • melekat eritrosit dengan siklon anti-B adalah tanda kumpulan darah III;
  • jika biomaterial telah bertindak balas dengan semua bahan, maka ia tergolong dalam kumpulan IV.

Kumpulan darah yang diperiksa O (I)

Untuk memeriksa ketepatan keputusan dan menentukan faktor Rh, suatu siklon AB ditambah kepada sampel biomaterial - jika reaksi aglutinasi telah berlaku, ia ditentukan dalam darah sebagai positif (ketiadaan eritrosit yang melekat menunjukkan faktor Rh negatif). Untuk mengecualikan penyakit di mana aglutinasi berlaku apabila bersentuhan dengan mana-mana kerengsaan, setitik darah pesakit dicampur dengan garam. Dalam kes-kes di mana ia tidak mungkin untuk menentukan keputusan secara visual, analisis itu dilakukan semula, dan sampel diperiksa di bawah mikroskop.

Jadual Reaksi jenis darah yang berbeza dengan siklon anti-A dan anti-B.

Coliclon Anti-B Dropper Bottle

Apa yang perlu dipertimbangkan semasa analisis?

Agar keputusan analisis dapat dipercepatkan, beberapa syarat harus dipatuhi semasa prosedur:

  • reagen perlu disimpan di tempat yang sejuk pada suhu + 2-8 darjah dalam botol dengan penutup tudung yang ketat (dalam hal melanggar peraturan penyimpanan, mereka dengan cepat kehilangan sifatnya);
  • Untuk analisis, tidak dibenarkan menggunakan polyclones yang sudah tamat tempoh (kira-kira 30 hari) atau cecair yang mengandungi sedimen, serpihan atau serpihan;
  • kajian itu dilakukan di dalam bilik yang terang pada suhu udara tidak lebih rendah daripada +15 dan tidak lebih tinggi daripada +25 darjah, dan tidak boleh menjadi kotoran, debu dan faktor lain yang boleh memesongkan hasilnya;

Suhu udara semasa prosedur mestilah

Proses pengumpulan darah

Waktu tindak balas hendaklah sekurang-kurangnya 3 minit, dan jika hasilnya dipertikaikan, masa pemerhatian untuk sampel biomaterial perlu dilanjutkan kepada 5 minit. Walau bagaimanapun, selepas 10 minit, biomaterial akan menjadi kering dan sel-sel darah merah semulajadi akan berkurang, jadi anda tidak perlu mempercayai kajian ini.

Apa yang boleh menjejaskan hasilnya?

Siklon adalah sensitif terhadap faktor persekitaran, masing-masing, apabila menjalankan kajian, perlu melihat keadaan suhu dan peraturan kebersihan - ruang harus bersih dan kering, dan sampel darah individu tidak boleh bersentuhan antara satu sama lain. Selain itu, dalam beberapa patologi, darah manusia dapat mengubah ciri-cirinya, hasilnya penyelidikannya lebih rumit. Oleh itu, pada pesakit dengan disfungsi hati, limpa, proses septik dan luka bakar yang meluas pada pesakit, kononnya percikan darah yang diperhatikan - eritrosit mendakan walaupun dalam tindak balas dengan larutan garam. Gambar yang berlainan diperhatikan pada pesakit dengan leukemia dan bayi yang baru dilahirkan - sel darah tidak bertindak balas terhadap rangsangan, yang menjadikannya mustahil untuk mengesan reaksi pelekat.

Apa yang mempengaruhi keputusan prosedur

Beri perhatian! Di samping itu, kembar, orang yang mempunyai sumsum tulang yang dipindahkan, atau mereka yang telah menjalani pemindahan darah berulang, pelbagai jenis sel darah merah yang wujud bersama dalam cecair biologi - masing-masing, keputusan yang tidak menentu diperhatikan semasa analisis. Untuk menentukan kumpulan dalam kes-kes di atas, ujian makmal tambahan diperlukan menggunakan peralatan khas.

Analisis menggunakan siklon adalah salah satu cara yang paling mudah dan paling tepat untuk menentukan kumpulan darah seseorang. Jika semua peraturan dan syarat prosedur diperhatikan, kebarangkalian hasil yang salah akan dapat diminimumkan, oleh itu, reagen kimia jenis ini digunakan di hampir semua makmal moden.

Video - Penentuan jenis darah menggunakan siklon

Seperti artikel ini?
Simpan untuk tidak kalah!

Artikel Tambahan Mengenai Embolisme